ABSTRACT
INTRODUÇÃO: A terapia fotodinâmica (PDT) é uma modalidade terapêutica para o tratamento de doenças neoplásicas e não neoplásicas tendo como alvo a mitocôndria, organela que tem atraído maior atenção devido ao seu envolvimento direto no processo de morte celular. Inibindo a atividade mitocondrial é possível estudar outras organelas envolvidas no processo de morte celular. O objetivo deste estudo foi avaliar a importância da mitocôndria no processo de morte celular na linhagem celular M3, induzida após a fotossensibilização com Photosan3®. MÉTODOS: Para os experimentos foram utilizados os seguintes grupos: grupo controle I, células sem nenhum tratamento; grupo II PDT, células incubadas com Photosan3®; grupo III PDT, células incubadas com CsA e Photosan3®; grupo IV células tratadas somente com Estaurosporina (STS). Após a incubação com o fotossensibilizador os grupos II e III foram irradiados com diodo laser semicondutor (λ 670 nm). Todos os grupos foram incubados a 37 ºC em estufa com atmosfera de 5% de CO2, por 24 h e 48 h. No final destes períodos todos os grupos foram submetidos ao ensaio de citotoxicidade, pelo teste de MTT (brometo de 3-[4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazólio) e corados com anexina V e iodeto de propídio para determinar a proporção de morte celular, sendo as análises realizadas por microscopia de fluorescência. RESULTADOS: Os resultados mostraram que as células realizaram apoptose por via independente de mitocôndria. A CsA apresentou-se eficiente na inativação da mitocôndria no processo apoptótico durante a fotossensibilização com Photosan3®. CONCLUSÃO: A associação de CsA e Photosan3® na terapia fotodinâmica demonstrou a presença de morte celular por apoptose independente da participação mitocondrial.
INTRODUCTION: Photodynamic therapy (PDT) is a therapeutic modality for the treatment of neoplastic and non-neoplastic diseases. Mitochondria have attracted great attention due to their direct involvement in the cell death process. By inhibiting the mitochondrial activity, it is possible to study other organelles involved in the cell death process. The objective of this study was to evaluate the involvement of mitochondria in induced cell death process in M3 cell line after photosensitization with Photosan3®. METHODS: The experiments involved the following groups: control group I, cells with no treatment; group II PDT, cells incubated with Photosan3®; group III PDT, cells incubated with CsA and Photosan3®; group IV, cells treated only with treated only Staurosporine (STS). After incubation with the photosensitizer, the groups II and III were irradiated using a semiconductor laser diode (λ 670 nm). All groups were incubated at 37 ºC in an atmosphere of 5% CO2 for 24 and 48 h. After this period, all groups were subjected to the MTT (3 - [4,5-dimethyl-thiazol-2-yl] -2,5-diphenyltetrazolium bromide) cytotoxicity assay and labeled with Annexin V and Iodide Propidium to determine the rate of cell death. The analyses were performed by fluorescence microscopy. RESULTS: The results show that PDT Photosan leads to apoptosis of breast cell line M3 by a route independent of the mitochondria. CONCLUSION: The association of CsA and Photosan3® in photodynamic therapy showed the occurrence of cell death (apoptosis) independent of mitochondrial participation.
ABSTRACT
In this study the effects of infrared lamp illumination during the muscle fatigue process was studied. Three different groups (n=5) were used: one control group and two treated (Infrared Lamp 780-1400nm), with the energy densities of 0.5 and 1.0 J/cm² and time of illumination of 300 seconds. The treated animals were illuminated in one point directly in the tibialis muscle, after the first tetanic contraction out of six, with an interval between each tetany. The results were registered in an electrophysiograph and the intensity of the force of contraction in grams was analysed. It was observed that the control group presented a reduction in the intensity of the force of contraction, while the treated group managed to maintain it, which was clearly evident in the energy density of 0.5 J/cm². It was concluded that the use of the infrared lamp illumination was efficient concerning resistance to muscle fatigue.
Neste estudo investigamos o efeito da irradiação da lâmpada infravermelha durante o processo de fadiga muscular. Foram utilizados 3 grupos diferentes (n=5), sendo 1 grupo controle e 2 irradiados (Lâmpada de Infravermelho 780-1400nm), nas densidades de energia 0,5 e 1,0J/cm² e tempo de irradiação 300 segundos. Os animais irradiados receberam 1 irradiação em 1 ponto, diretamente no músculo tibial, após a primeira contração tetânica de um total de seis, com um intervalo entre cada tetania. Os resultados foram registrados em eletrofisiógrafo e analisado a intensidade da força de contração em gramas. Foi observado que o grupo controle apresentou uma redução na intensidade da força de contração, já os grupos irradiados conseguiram mantê-la, sendo mais evidente quando irradiado com densidade de energia (DE) de 0,5J/cm². Conclui-se que a utilização da irradiação da lâmpada infravermelha é eficaz na resistência a fadiga muscular.
ABSTRACT
Terapia fotodinâmica (TFD) vem sendo considerada um moderno tratamento para o câncer e severas outras condições médicas.O presente estudo tem por objetivo analisar as alterações morfológicas e ultraestruturais de células neoplásicas Hep-2 submetidas a TFD utilizando a Zinco Ftalocianina.Células Hep-2 foram cultivadas de maneira padrão com meio MEM, incubadas com a ZnPc na concentração 9mM por 1 hora, irradiadas com um laser de diodo, analisadas através de técnicas de Microscopia de Fluorescência utilizando marcadores específicos (DAPI e JC-1) e Microscopia Eletrônica de Transmissão. As células neoplásicas Hep-2 submetidas a TFD mostraram-se fotodanificadas morfológica e ultraestruturalmente, sendo possível observar algumas alterações nas organelas celulares. Portanto, pode-se concluir que após TFD utilizando a ZnPc estas células sofreram morte por apoptose...
Photodynamic Therapy (PDT) have been considered a modern treatment for cancer and several others medicalconditions. The present study has for objective to analyze the morphological and ultrastructural alterations of Hep-2 neoplasic cells submitting to PDT using a Zinc Phthalocyanine. Hep-2 cells were cultivated of standard form with MEM medium, incubated with the ZnPc at9mM concentration for 1 hour, irradiated with a diode laser, analyzed through of technique of Fluorescence Microcopy using specific staining (DAPI and JC-1) and Transmission Electronic Microscopy. The Hep-2 neoplasic cells submitted to PDT presented photodamaged morphological and ultrastructurally, have been possible to observe some alterations in the cell rganelles.Therefore, we can conclude that after PDT using the ZnPc these cells suffer death for apoptosis...